Soutenance de thèse de Ana PALACIOS ACEDO

Les accidents thromboemboliques sont la deuxième cause de décès chez les patients atteints d’un cancer. Ils sont également synonymes de mauvais pronostic et d’une maladie plus agressive. Cette augmentation du risque thrombotique est en partie due à une activation accrue des plaquettes par les cellules tumorales. La dégranulation des plaquettes activées dans le microenvironnement tumoral peut contribuer aux signaux de croissance, d'inflammation et d'angiogenèse ; les plaquettes masquent également les cellules métastatiques pour les protéger dans la circulation. Cela suggère que les médicaments antiplaquettaires pourraient être utilisés pour ralentir le développement du cancer. Le clopidogrel, un inhibiteur spécifique de la protéine P2RY12 des plaquettes, a montré un effet anticancéreux dans des études antérieures. Traditionnellement, P2RY12 a été décrit comme étant spécifique aux plaquettes en circulation. Ici, nous avons examiné si P2RY12 pouvait être trouvé dans les cellules cancéreuses et quel effet il exerçait. Nous avons découvert que les cellules d'adénocarcinome du canal pancréatique, mais pas les adénocarcinomes colorectaux, exprimaient P2RY12. L'inhibition de cette protéine a conduit à des tumeurs primaires plus petites, des sites métastatiques plus petits et moins nombreux ainsi qu'à une réduction du risque thrombotique chez les souris porteuses de cancer. Il est intéressant de noter que les cellules cancéreuses du pancréas étaient capables de sécréter de fortes concentrations d'ADP, qui se lie et active P2RY12 à la fois sur les cellules cancéreuses et sur les plaquettes circulantes. Les cellules cancéreuses produisent activement des microvésicules, avec le potentiel de fournir une multitude d'informations sur le développement de la tumeur. Nous avons réalisé une étude préliminaire qui a montré qu'au moins un tiers de toutes les microvésicules circulantes portant P2RY12 chez des humains atteints de cancer du pancréas étaient effectivement issues du cancer. Nous avons caractérisé une population de microvésicules présentant à la fois des marqueurs de membrane cancéreuse et plaquettaire ainsi que P2RY12 à leur surface. Nous montrons également que les cellules cancéreuses humaines primaires en culture semblent changer la signature des microvésicules, et peuvent produire des microvésicules avec le marqueur plaquettaire traditionnel CD41 ainsi que le marqueur du cancer connu Ca125. Dans l'ensemble, nous nous sommes efforcés de montrer un nouvel angle des conséquences des interactions entre les plaquettes et le cancer. Nous pensons que le P2RY12 des cellules cancéreuses pourrait être une nouvelle cible thérapeutique dans le cancer du pancréas qui mérite des études plus approfondies. Le même P2RY12 est potentiellement localisé dans les microvésicules pour engager davantage les plaquettes dans la circulation et autour des tumeurs primaires. Nous avons également montré que le microvésiculosome pourrait être un marqueur de cancer ou de thrombose associée au cancer, ce qui devrait également être caractérisé davantage. Plus spécifiquement, les microvésicules portant du Ca125, du P2RY12 et des marqueurs de plaquettes et de cellules cancéreuses car elles pourraient être des balises qui précèdent la propagation métastatique.

Thromboembolic events are the second most common cause of death in oncology patients. They also portend poor prognosis and more aggressive disease. This increase in thrombotic risks is mainly due to the production of tumour-derived procoagulant microvesicles and a direct activation of platelets by tumour cells. Activated platelet degranulation in the tumoral microenvironment can contribute growth, inflammatory and angiogenesis signals; they also cloak metastatic cells to protect the in circulation. This suggests that anti-platelet drugs could be used to slow cancer development. Clopidogrel, a specific inhibitor of platelet-P2RY12 showed an anti-cancer effect in previous studies. Traditionally P2RY12 has been described to be specific to platelets in circulation. Here, we examined if P2RY12 could be found in cancer cells and what effect it exerted. We found that pancreatic ductal adenocarcinoma cells, but not colorectal adenocarcinomas, expressed P2RY12. The inhibition of this protein led to smaller primary tumours, smaller and less numerous metastatic sites as well as a reduction of the thrombotic risk in cancer bearing mice. Interestingly, pancreatic cancer cells were capable of secrete high concentrations of ADP, which, in turn, binds and activated P2RY12 on both cancer cells and circulating platelets. The cancer cells seem to be actively producing microvesicles, providing a wealth of information on the tumour development. We preformed a preliminary study a show that at least one third of all circulating P2RY12-bearing microvesicles in humans with pancreatic cancer were indeed cancer derived. We characterized a population of microvesicles with both cancer and platelet membrane markers as well as P2RY12 on their surface. We also show that primary cancer cells in culture appear to change the microvesicle signature and can produce microvesicles with traditional platelet marker CD41 as well as known cancer marker Ca125. Overall, we strived to show a new angle of the consequence of platelet interactions with cancer. We believe that cancer-cell P2RY12 could be a novel therapeutic target in pancreatic cancer that warrants further studies. The same P2RY12 is potentially being localized in microvesicles to further engage platelets in circulation and around the primary tumour suite. We have also shown that the microvesiculosome could be a cancer or cancer-associated thrombosis marker as should also be further characterized. More specifically, the microvesicles bearing Ca125, P2RY12 and markers of platelets and cancer cells as they may be beacons that precede metastatic spread.